在生物化学和免疫学领域中，四甲基联苯胺（TMB）是一种常用的显色底物，尤其是在酶联免疫吸附测定（ELISA）等实验中。其显色反应的原理主要依赖于过氧化物酶（如辣根过氧化物酶HRP）催化的氧化还原反应。
当过氧化物酶与TMB和过氧化氢（H₂O₂）共同作用时，TMB会被氧化成一种带有颜色变化的产物。这个过程可以简单描述为：
1. 初始状态下，TMB是无色或浅黄色的。
2. 在过氧化物酶的作用下，TMB被氧化成一种蓝色的化合物。
3. 当反应终止剂加入后，这种蓝色会迅速转变为黄色。
这种颜色的变化可以通过分光光度计测量吸光度来量化，从而用于检测目标物质的存在与否及其浓度。由于TMB显色反应具有高灵敏度、良好的线性范围以及易于操作的特点，因此广泛应用于各种分析检测中。
需要注意的是，在使用TMB进行显色时，应避免长时间暴露于光照下，因为光线可能会加速反应进程导致结果偏差。此外，正确选择合适的终止剂也非常重要，以确保获得准确可靠的数据。
总之，通过理解并掌握四甲基联苯胺显色反应的基本机制，我们可以更好地利用这一技术手段来进行科学研究及实际应用。
